一种高效提取厌氧颗粒污泥微生物总RNA的方法
发布时间: 2022-05-05
来源: 试点城市(园区)
基本信息
本发明属于环境分子生物学技术领域,涉及一种高效提取厌氧颗粒污泥微生物总RNA的方法,取活性污泥离心,弃上清,然后向离心管内加入灭菌玻璃珠和贮存液Ⅰ,将离心管管盖拧紧后置于旋涡混合器击打,离心弃上清,磷酸盐缓冲液洗涤;加入贮存液Ⅱ温育;加入TRIzol,漩涡振荡后离心取上清,加入氯仿,漩涡振荡,室温放置并离心取上清,加入异丙醇,-20℃放置后离心弃上清,加入75%乙醇洗涤沉淀,离心弃上清,风干沉淀,贮存液Ⅲ溶解核酸沉淀,加入DNase?I(RNase?free)和RNase抑制剂,采用RNA纯化试剂盒纯化RNA。简化了微生物总RNA提取步骤,实现了快速、高效的提取厌氧颗粒污泥的微生物总RNA。