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空肠弯曲菌的磁捕获-荧光PCR检测新技术

发布时间: 2020-04-16

来源: 科创中国_资源共享平台

基本信息

合作方式:
成果类型: 新技术
行业领域:
文化、体育和娱乐业
成果介绍
技术投资分析: 1.特点:应用抗血清和磁性微珠自行制备弯曲菌免疫磁珠,利用弯曲菌免疫磁珠直接捕获检样中目的菌,不需要增菌培养;设计用于同时检测空肠弯曲菌鞭毛蛋白A(flaA)基因和马尿酸酶(hipO)基因的引物与荧光标记探针,通过荧光PCR检测flaA基因和/或hipO基因,建立空肠弯曲菌的磁捕获-荧光PCR检测新技术;该技术方法简便易行,可在一个工作日内完成,特异性好,敏感度高,抗干扰性强,可以鉴别区分空肠弯曲菌与其它弯曲菌,检测低限达到10cfu/mL,解决了活的非可培养状态或受损伤的空肠弯曲菌检测难题;该技术方法申请了发明专利,是一种适用于检验检疫、疾病预防和农产品安全检验等领域的快速技术方法。 2.指标:对比传统的空肠弯曲菌检测方法,本技术方法具有多方面的优势: ①简便快速,磁捕获-荧光PCR法检测空肠弯曲菌可在1天内完成,传统的检测方法阴性结果需5天,阳性结果需5~14天。 ②特异性好,单独用免疫磁珠分离方法缺乏种间的特异性,并且由于不能完全消除交叉反应,就有可能和其它杂菌发生非特异性结合;在免疫磁珠分离方法的基础上利用实时荧光PCR进行鉴定,专一性更高、结果更准确。 ③敏感度高,敏感度是检验方法是否成熟有效的重要指标,磁捕获-荧光PCR法对空肠弯曲菌的检测低限为10cfu/mL,达到甚至超过了传统检测方法的检测低限。 ④抗干扰性强,免疫磁珠方法直接从检样中捕获靶细菌,去除了PCR抑制物质;同时由于荧光PCR特异性扩增空肠弯曲菌DNA,免疫磁珠吸附的包括结肠弯曲菌在内的其它细菌不会干扰PCR,免疫磁珠分离结合荧光PCR技术从根本上解决了干扰及抑制问题。 技术的应用领域前景分析: 主要用于检验检疫、疾病预防和农产品安全检验等领域的空肠弯曲菌快速检测试剂盒。 效益分析: 1.投资条件:具有现成诊断试剂生产设施的企业,流动资金30-50万元。 2.预期效益:磁捕获-荧光PCR检测试剂盒生产成本较低,产品销售后可实现50%的利润率,经济效益显著。 厂房条件建议: 无 备注: 无
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