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DNA分子量标准生产型载体的构建与应用

发布时间: 2020-04-16

来源: 科创中国_资源共享平台

基本信息

合作方式:
成果类型: 新技术
行业领域:
文化、体育和娱乐业
成果介绍
技术投资分析: 本成果的创新点在于一系列“超级”载体的构建,目前世界范围内尚没有第二方(生物技术公司、实验室等)能够构建同种“超级” 载体。  利用本成果之超级载体可以生产目前市场上流行的100bp ladder、200bp ladder、DL2000、DL3000、1kb ladder等各种DNA分子量标准(DNA marker)。利用大肠杆菌发酵培养可以将生产规模放大到工业级生产,经过实验室水平的小试,每升LB发酵液(菌体)可以制备500支DL2000或DL3000,市场价值2万元左右。 目前国内DNA分子量标准(DNA marker)的生产主要是利用PCR扩增的方式,是一种劳动密集型的活动,技术水平低,要对各条带进行调配(混匀),同时由于批次之间的扩增效果的差异,使之难以实现大规模生产,总体成本较高(主要体现在劳动力和试剂成本方面)。国外生物技术公司由于劳动力成本较高,目前仍采用特殊载体酶切的方式生产DNA分子量标准(成本低)。如美国的Invitrogen 和Promega 公司主要采用不完全酶切(partial digestion)和人工载体的完全酶切来生产DNA分子量标准。本成果采用的生产方式与国外公司相同,但技术水上更高一个层次,本系统彻底解决了这一问题,可以很好的实现大小带之间亮度的一致,而且进一步实现了小带比大带亮的效果,效果可以与PCR marker相媲美,同时大大提高了产率。 本系统与国内DNA分子量标准(DNA marker)的生产技术相比享有下列优势:①技术先进,生产规模可以无限放大,而PCR扩增可操作的量很小;②节约劳动力,有效的降低了成本;③稳定性高,由于本系统一次可以进行上万管的生产,故各包装之间几乎没有差异, 具有完全的一致性。 技术的应用领域前景分析: DNA分子量标准(DNA marker)生产型载体是采用全新基因工程原理构建的一系列载体(质粒),用以生产目前生物技术、医药、农业科研领域应用广泛的电泳“耗材”――DNA分子量标准(DNA marker)。 效益分析: 由于DNA分子量标准是一种耗材型的实验用品,故市场需求量很大,而且具有持续性。本成果一个月的生产量(中等规模、1-2名技术人员)可以达到5万管,按目前最低市场价格计算(45元/管),产值可达225万元。而所有成本性消耗不会高于5万元。 厂房条件建议: 主要设备:发酵罐或摇床、大容量离心机、灭菌锅、1-2名技术员、100平米实验用地、对环境无特殊要求、无“三废”产生。 备注: 无
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