科创中国

项目采用 MLVA-16 分型法、原核真核表达、CCK8试验、MTS试验、流式细胞式试验及实验小鼠抗体检测，我省目前流行的布鲁菌存在丰富的基因多态性；布鲁氏菌的外膜蛋白Omp10，Omp15，Omp19，Omp22，Omp25，Omp31在DE3表达菌的包涵体中表达，纯化蛋白后，Omp25表达量最高，达*** mg/mL。转染293T细胞，上述Omps蛋白在真核细胞的细胞浆内和细胞膜上都发现了明显的荧光信号。小鼠脾淋巴细胞增殖能力显著增强，具有增强细胞免疫功能的作用；MTS试验发现Omp10、Omp22、Omp25、Omp31对淋巴细胞活力的影响更明显，可很好刺激淋巴细胞增殖，刺激小鼠产生细胞免疫应答。流式细胞仪进行检测，在小鼠脾脏中CD3+ 、CD4+和CD8+都有一定的比例产生，而且实验组 CD4+/ CD8+比值要小于 PBS 组，认为CD8+介导的免疫占据了主要作用，促进 CD8+T 淋巴细胞的增殖分化，表明激发了显著的 CTL效应。真核表达后免疫小鼠，小鼠血清中抗体水平，各外膜蛋白刺激小鼠血清中的抗体呈现出上升的趋势，说明布鲁氏菌核酸疫苗诱导小鼠产生了体液免疫效果，从免疫过程中可以看出 Omp31 组的小鼠血清抗体效价最高。