一种生物多糖高分子微球固定化β-半乳糖苷酶及其制备方法
发布时间: 2021-11-17
来源: 科技服务团
基本信息
一种生物多糖高分子微球固定化β-半乳糖苷酶及其制备方法,以罗望子胶,沙蒿胶,黄原胶,瓜尔豆胶等生物多糖高分子材料制备的微球为载体通过戊二醛交联法固定化β-半乳糖苷酶.该固定化酶,活力为***载体,活力回收率为51-62%.固定化酶稳定性提高,最适宜pH值为***,最适宜温度为41℃-43℃,表观米氏常数(Km)为***×***×10-4.罗望子胶,沙蒿胶,黄原胶,瓜尔豆胶等生物多糖高分子材料作为载体固定化β-半乳糖苷酶可将乳糖水解为β-半乳糖和葡萄糖,无毒,生物相容性好,易于回收和重复使用,可应用于低乳糖乳制品的生产.
主权项:
1.一种生物多糖高分子微球固定化β-半乳糖苷酶制备方法,其特征\r\r\r\r\n是:步骤如下,\r\r\r\r\n步骤1:在50ml水中,加入胶体物,及有机石蜡、乙酸乙酯、span-80,在\r\r\r\r\n500rpm/min的转速下搅拌20min,缓慢滴加甲醛3ml,搅拌1hr,倾去上\r\r\r\r\n清液,用石油醚、丙酮洗涤,再用无水乙醇作溶剂洗涤若干次,得胶体物微球;\r\r\r\r\n步骤2:所得胶体物微球再用***%的对氨基苯磺酸溶液处理,真空干燥,即\r\r\r\r\n得表面羟基被对氨基苯磺酸磺酰化的胶体物微球;\r\r\r\r\n步骤3:称取上述微球2g,加入380u/100ml的β-半乳糖苷酶液***,\r\r\r\r\n加入***%的戊二醛,在4℃、***的条件下反应10hr,抽滤,用缓冲液或\r\r\r\r\n蒸馏水洗除剩余戊二醛和未交联的酶,直至检测不出蛋白质,即得胶体物微球\r\r\r\r\n固定化β-半乳糖苷酶。