一种pH稳定比酶活高的重组碱性果胶酶及其构建方法
发布时间: 2021-08-26
来源: 科技服务团
基本信息
本发明公开了一种pH稳定性好、比酶活高的碱性果胶酶和编码基因及其构建方法。采用定点诱变技术将枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis168的碱性果胶酶编码基因pel168进行诱变,将457位的鸟嘌呤G变成胸腺嘧啶T,使得编码的果胶酶的成熟肽第132位的缬氨酸V突变成苯丙氨酸F,突变基因pel168V132F在大肠杆菌RossetBlue(DE3)进行表达,经诱导表达、破菌、纯化,再将纯化的酶进行酶活测定,得到的果胶酶突变体PEL168V132F比原始的果胶酶PEL168在pH为3、5、6时,相对活性有显著提高,同时比酶活也是原始酶的***倍。这为碱性果胶酶的广泛应用奠定了良好的基础。