利用CRISPR-CAS9技术敲除HEK293T细胞KDM2A基因的方法
发布时间: 2021-08-25
来源: 科技服务团
基本信息
本发明提供了一种CRISPR‑CAS9技术敲除HEK293T细胞KDM2A基因的方法,步骤如下:(1)、细胞转染;(2)、细胞基因组提取;(3)、PCR鉴定;(4)、基因水平验证;(5)、蛋白水平验证:在基因水平验证突变细胞株后,用蛋白质免疫印迹(Western blotting)进一步验证K3、K7‑1和K7‑2是KDM2A基因缺陷型。本发明还同时提供了利用上述方法制备的KDM2A基因敲除的HEK293T细胞系及以其作为细胞模型在研究KDM2A甲基化酶所涉及的细胞增殖和凋亡信号通路中的应用。