成果介绍
关键技术名称概念:环状RNA过表达载体是一种用于环状RNA(circRNAs)功能性过表达研究的质粒载体。本公司的环状RNA过表达载体内含有吉赛独家研发的两个环化表达框架,使环状RNA连入载体后能在体外高效率表达,并保证插入的目的环状RNA片段正确环化。本公司现已开发四种环状RNA过表达载体,适用于普通真核表达,慢病毒包装,绿色荧光和嘌呤霉素筛选等多种用途。技术先进性:环状RNA由于其结构的特殊性,对其功能研究有较大的局限性。对于环状RNA的功能性过表达研究还未有较好的技术,有国外研究者尝试在载体上加入环状RNA上游10kbps序列和下游10kbps序列来在体外转录生成环状RNA,但由于加入序列长度过大,体外表达效率极低,仅能使环状RNA过表达15倍左右。本产品基因序列仅有不到8kbps,载体转染和体外转录效率高,转染细胞后能使环状RNA过表达200倍以上。技术特点及创新点:本公司的环状RNA过表达载体基因序列短,细胞转染效率高,体外转录效率高,环状RNA过表达倍数高,环化准确率高,对线性RNA无影响。本产品创新性地加入了自主研发的两个环化表达框架,研究者仅需以普通PCR法扩增目的环状RNA的线性片段,以酶切连接的方法克隆进空载体内即可,大大缩短了实验周期。本产品的四种环状RNA过表达载体中四种可用于普通真核表达,两种可用于慢病毒包装,两种可用于绿色荧光或嘌呤霉素筛选,适用性广泛,可满足各种功能性研究和检测。技术与产品应用领域:环状RNA(circRNAs)是区别于传统线性RNA的一类新型RNA,具有闭合环状结构,大量存在于真核转录组中且在不同的物种间具有保守性,已有研究表明环状RNA可以转录后调控等方式参与动脉粥样硬化、神经系统紊乱、糖尿病和肿瘤等疾病发生过程。环状RNA对核酸酶不敏感,所以比线性RNA更为稳定,这使得环状RNA在作为新型临床诊断标记物的开发应用上具有明显优势。本产品是进行环状RNA功能性过表达研究的最有效方法,应用于生命科学领域的分子生物学研究,针对日趋热门的环状RNA研究,可为广大分子生物学研究的科研院校、研究所及生物、医药和医疗器械技术行业中科研部门的研究人员提供技术和产品,为环状RNA研究和相关临床诊断标志物的研究与开发提供基础,推动生命科学研究发展。
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